培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，看似简单，里面却蕴含着大学问。
1.怎样查到某个特定细胞株的相关知识和培养条件？
ATCC（American Type Culture Collection）收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cells and hybridomas链接，输入细胞名称就可以搜索ATCC的细胞数据库。数据库中有每一种细胞的详细描述，包括细胞的来源，培养和冻存条件，以及相关文献等资料。
2.培养基中添加了血清和抗生素后，可以长期保存吗？
在新鲜培养基中添加血清和抗生素后，应该在一到两周内用完。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
3.培养基中是否必须添加抗生素？
除了特殊筛选系统外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。为防止细菌、真菌污染，可以加入青霉素-链霉素双抗溶液，其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml，链霉素为100ug/ml，但是不建议长期使用。
4.液体培养基可以放-20℃保存吗？
不可以！因为在-20℃下，培养基中的盐容易析出，培养基解冻后，有的盐可能无法重新溶解，从而导致培养基渗透压降低，培养细胞时，造成细胞破裂而死亡。
5.为何培养基保存于4℃冰箱中颜色会偏暗红色，且pH值越来越偏碱性？
培养基保存于4℃冰箱中，培养基中的CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中的酸碱指示剂(通常为酚红) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱将造成细胞生长停滞或死亡。
6.为什么液体培养基1640颜色发黄，是pH值的问题吗？
因为配方原因。1640为减酚红型，其中酚红的浓度只有DMEM的四分之一，所以是因为酚红浓度低，而非PH值低。
7.培养液渗透压是怎样影响细胞生长的？
当细胞内、外环境的分子浓度不同时就会产生渗透压。这种情况下，水分通过渗透流入或流出细胞，从而改变细胞的内环境。高渗透压迫使水分从细胞中扩散出来导致细胞收缩，这种情况会使DNA和蛋白遭到破坏，细胞周期停滞以及最终使细胞死亡；反之，低渗透压使水分流入细胞内，使细胞肿胀破裂。
8.为什么有客户要求培养基中不含酚红？
研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，细胞培养，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加酚红的培养基。
9.培养基中丙酮酸钠的作用是什么？
丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM，-20℃保存，培养基中的终浓度为1mM.
10. 培养基中谷氨酰胺的作用是什么？
几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有较高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。
11.为什么在培养基中加入HEPES？
培养基中最常用的Buffer system是碳酸氢盐，它可提供营养，但在生理pH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在pH7.2-7.6条件下增强缓冲能力。Hepes的贮存液浓度一般为1M，常温保存。培养基中的终浓度为25mM，即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中。
12.自己新配制的液体培养基能保存多久？
建议将新配制的培养基放置于4℃，避光保存尽量在一周内使用完毕，培养基越新鲜越好。
